유전자

신종플루 확진검사장비

2009-11-13T13:47:15Z

Online Rapid Cycling Real-time PCR system with Various Parameter Specific Reagents

What is Real Time and On-line PCR?

END-POINT analysis 인 현재의 PCR은 주로 PCR반응후의 산물을 agarose gel에서 분리해 확인하고 대강의 양을 어림잡는데 그쳤다고 할 수 있으나 정확한 정량을 보다 신속히 할 필요성이 커지고 있다. 실제로 Gene Expression(RNA)Analysis, Gene Copy Assay, Genotyping, Immuno-PCR 등에서 sample에 있는 target의 정확한 측정은 매우 중요하다.
위의 그림을 참조하면 각기 다른 농도의 sample을 END-POINT analysis인 기존의 PCR 시행시에는 명확한 차이점을 결론내기가 어렵다. 왜냐하면 이론적으로 PCR 반응산물은 Cycle이 반복될수록 기하급수적으로 증가하나, 실제 tube안에서는 일정시점에 도달하면 여러 제한요소의 작용에 의해 더 이상의 반응이 없는 Plateau를 보이기 때문이다, 이러한 END-POINT analysis의 오류를 최소화하기 위한 Quantitative competitive PCR법이 고안되어 사용되고 있으나 PCR실험시마다 적합한 competitor의 선택문제, target과 competitor의 적정 한 비율범위를 맞추기 위한 여러 농도에서의 실험을 행하는 문제등 매우 복잡하며 실제 실험에서의 성공확률도 매우 적다고 한다.
이러한 한계점을 해결키 위해 PCR반응시 PCR효율이 지속되는 Log-Phase analysis를 행하게 되면 각기 다른 농도값의 sample을 정확히 정량하여 차이점을 확실히 보여줄 수 있으며 PCR 매 Cycle의 진행상황을 모니터링하는 Real-Time PCR 기술이 개발되었다. 또한 매 Cycle 의 진행상태를 신속히 측정할 수 있도록 fluorescence detection(in the tube detection)도 개발되었다. 즉 Real-Time PCR instrument는 PCR을 위한 Thermal cycler와 fluorescence detection을 위한 fluorometer를 합체한 기기라 할 수 있다.

LightCycler 내부구성

LightCycler의 구조는 위의 그림과 같이 thermal chamber내의 온도를 변환시키는 heating & cooling part와 fluororescein으로 부터 나오는 시그널을 감지할 수 있는 fluorometer로 나눌 수 있다. LightCycler는 기존의 Block style이 아닌 Capillary cuvette를 사용하므로 초당20℃ 까지 온도변화를 수행 할 수 있어 한 CYCLE당 30-60초의 시간소요가 계산되므로 기존의 BLOCK style과 비교시 상상할 수 없는 시간을 절약가능케 한다.
Heating과 Cooling의 기본원리는 바깥공기를 흡입, heating coil을 통과시켜 온도를 올리고 chamber내의 Fan을 이용, chamber내의 공기를 고속분출시켜 cooling시키게 된다.
또한 air를 온도변환매개체로 사용 하므로 chamber에 위치하게 될 Capillary cuvette내의 sample의 온도조건은 모두 동일하다고 할 수 있다.
LightCycler는 광원으로 LED(Light Emitting Diode)로 470nm의 파장을 발산하며 이 LED는 수명이 반영구적으로 특별한 고장이 없다는 것이 큰 장점이다. 이 광원에서 나온 빛은 epi-illumination lens에 모아져 Capillary를 통해 sample에 전달되게 된다.
sample에서 나온 형광시그널은 같은 렌즈에서 모아져 dichromic mirror에 의해 각 형광물질의 적절한 파장을 감지할 수 있는 filter(530,640,710nm)를 통과하여 Photohybrids에 기록된다. 최대 32개의 Capillary cuvette은 Rack역할을 하는 sample caroseul에 위치하게 되며 stepper motor에 의해 fluorescein을 측정할 수 있는 detector에 정확히 위치시켜주게 되며 한 개의 sample을 측정 하는 데는 20msec이 소요되므로 32개의 sample을 측정하는데는 5초정도밖에 걸리지 않게 된다.
LightCycler 는 유일한 Real-Time & On-Line 시스템으로 매 Cycle마다의 진행상황을 체크할 수 있으므로 문제발생시 혹은 더 이상의 실험이 필요 없을시는 언제든지 멈출 수 있으므로 시간 및 경제적으로도 유용한 System이라 할 수 있다

LightCycler Applications

1. The concept of Quantification

기본적인 Quantification의 이론은 external standard를 이용하는 것이며 우선적으로 실험에 사용한 serial diluted external standard의 PCR 효율이 지속적으로 나타나는 직선구간인 log Phase를 정의내려준 후 baseline과 분리되기 시작하는 지점에 직선을 그어주어 두점이 만나는 crossing point를 구하여 standard curve를 작성한 후 (그림 하단부), 실험자가 원하는 target sample의 crossing point를 구한 후 standard curve위에 plotting하여 정량값을 구한다.
각 sample의Crossing point를 정량의 상대값으로 이용하는 것은 PCR 효율에 있어 이 부분은 어떠한 외부영향으로부터도 고유한 값을 나타내어 준다는 특성을 이용하는 것이고 이것을 각 sample의 농도값으로 환산하는 기능은 S/W에 의해 자동으로 이루어지게 된다

2. LightCycler Assay Format

1) SybrGreen I Format
SybrGreen I은 dsDNA에 결합하는 특징이 있어 특별한 Target sequence가 없어도 결합하므로 특정 target sample이 아닌 폭넓은 범위의 sample에 적용할 수 있는 특징이 있다. 또한 LightCycler를 이용시에는 SybrGreen I 의 특징을 최대한 고려, dsDNA가 완전히 생성되는 Extension(elongation) phase에서 detection step을 지정하여 최대한의 시그널을 얻을 수 있게끔 조절이 가능하다. 하지만 primer-dimer, noise band등 dsDNA에는 무조건 반응하는 특성도 있어 반응후에는 Melting Curve Analysis를 통하여 각 product의 Tm값을 확인하여 우리가 얻고자 하는 target이 정확히 얻어졌는지를 확인하여야 한다.

2) Hybridization Probe Format
이 방법은 2개의 특별히 디자인 된 probe가 사용되는데 2개의 probe sequence는 증폭되는 DNA fragment상에서 Target sequence위에 head-to-tail arrangement로 hybridization될 수 있도록 디자인되어 있다. 한쪽 probe의 3' 끝에는 donor dye가 붙어 있고 다른 probe의 5'끝에 acceptor dye가 붙어 있어 서로 인접하게 hybridization되어야만 Fluorescence Resonance Energy Transfer(에너지전이)가 일어나서 donor의 emission light가 acceptor의 excitation light로 작용 할 수 있다. 즉 근접한 donor dye가 Light Source에 의해 emission되면 전달된 에너지에 의해 acceptor dye는 형광을 발하게 되며 그 양은 PCR산물에 붙은 probe양에 비례한다. 이 방법은 PCR product identification의 최적의 specificity를 제공하는 DNA detection과 Single Point Mutation확인에 사용되는 방법이다

3) Hydrolysis Probe Format
Taqman Probe로 유명한 5' Nuclease Assay 는 Probe의 한끝에는 reporter fluorescein dye를 붙이고 다른 한 끝에는 quencher dye를 붙여 PCR이 진행될 때 5' 끝의 reporter fluorescein dye가 떨어지면서 내는 고유의 형광을 정량하는 방식이다. 이 probe는 target의 고유염기 서열이므로 specific product에만 붙으며 PCR반응이 없으면 3' 끝의 quencher dye에 의해 형광 이 억제되도록 디자인 된 것이다. PCR반응이 많으면 비례적으로 형광의 양도 누적하여 증가하므로 간접적인 측정수단이 될 수 있다.

*이외에도 molecular Beacon Probe 등도 사용이 가능

3. Mutation Detection

Hybridization Probe를 사용하여 specific target을 정량할 경우 Melting Curve Analysis를 수행하게 되면 sample의 정량값 뿐만 아니라 각 sample의 고유한 Tm값을 이용, 알려진 Point mutation에 대한 확인을 전기영동을 통해서가 아니라 software상에서 쉽게 할 수가 있다. Melting Curve Analysis를 수행하면 amplification과 유사한 1cycle이 실행이 되며 이때 Hybridization Probe는 single-stranded DNA에 binding하며 위의 그림에서 보여지는 것과 같이 perfect match된 것과 mismatch된 sample에서는 각기 다른 Tm값을 보여주어 software를 통해 쉽게 확인이 되어질 수 있다. 또한 complex mutation의 경우도 multiple probe를 이용, 한번의 반응으로 확인할 수가 있다.

System Description

Now available: The next-generation system version featuring new software with expanded analysis capabilities!

Achieve faster and easier assay setup with the new sample editor.
Set up experiments with just a few clicks, with options to refine your results later.
Benefit from enhanced templates and macros for all applications.
Perform genotyping based on endpoint analysis or melting curves.
Use basic and advanced methods for gene expression and genotyping.

The LightCycler 480 Real-Time PCR System is a fully integrated multiwell-plate based real-time PCR platform for highly accurate qualitative and quantitative detection of nucleic acids. Building on the benefits of Roche's capillary-based LightCycler^® Systems, it goes one step further in offering enhanced throughput, compatibility with automation equipment and maximum flexibility regarding hard- and software.
Providing novel ways to combine speed and accuracy without compromises, the LightCycler^® 480 Real-Time PCR System meets the needs of a broad range of applications in research fields such as gene expression studies, discovery and analysis of genetic variation or array data validation.

LightCycler^® 480 Real-Time PCR System benefits

SPEED & ACCURACY

Benefit from novel thermal cycling and data capture technologies to achieve outstanding temperature homogeneity and assay reproducibility.
Increase the sensitivity and yield of your real-time PCR applications, with robust LightCycler^® 480 reagents and specially engineered clear or white consumables.
Analyze true raw data, breaking free from the need to use passive reference dyes or normalization plates to get accurate results.

VERSATILITY & CONVENIENCE

Flexibly switch between 96- or 384-well plate formats, exchanging thermal block cyclers in just a few minutes with no recalibration time.
Select from numerous assay formats and detection dyes, expanding the range of real-time PCR applications in your lab.
Benefit from the intuitive and user-friendly Roche software interface.

COMPATIBILITY & SECURITY

Take advantage of the automation capabilities of the LightCycler^® 480 System, integrating it as part of a LIMS in combination with robotic pipetting and plate loading.
Conveniently analyze gene expression or genotyping data using a broad range of basic and advanced methods.
Know that your data are protected, using a system compatible with 21 CFR part 11 requirements.

MEET AND EXCEED THE CAPABILITIES OF OTHER REAL-TIME PCR SYSTEMS -TAKE YOUR GENOMIC RESEARCH TO A NEW LEVEL WITH THE LIGHTCYCLER^® 480 SYSTEM!

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유전자검사 기간문의

2009-11-13T08:23:28Z

부는 돌아가시고 모만 살아계시는데
법원에서 증인도 안된다고 유전자검사를 하라고 합니다.
유전자검사를 하는데 시간이 많이 걸리나요?
검사를 하려면 어떻게 해야 하는건가요?

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

친자확인검사의 검사 소요시간은 8시간입니다.

법원으로 제출되는 유전자분석 감정서는 당기관에서 피검사자의 신원을 확인하고 검사를 진행해야 합니다.
그러기 위해서는 내방 또는 방문출장 검사를 요청하시면 됩니다.
검사신청에 관한 문의사항이 있으시다면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 상담해드리겠습니다.

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친자확인 검사문의

2009-11-13T08:22:24Z

친자검사를 하려고 하는데 어떤게 결과가 제일좋나요?
혈액으로 검사를 하고 싶은데 혈액이 정확하지요?

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

친자확인검사를 수행함에 있어 검체(시료)만 확실하다면 검사결과는 모두다 정확하게 판정됩니다.
채혈은 의료법 위반으로 당 기관에서는 채혈을 할 수 없습니다.

검체(시료)의 종류에 관해서 문의사항이 있으시다면 1644-7207번으로 연락주십시오. 친절하게 상담해드리겠습니다.

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모발 중금속 검사

2009-11-13T08:21:24Z

모발 미네랄 검사 (중금속 및 미네랄)

1. 모발 미네랄 검사란 ?

모발 조직내에 존재하는 여러 미량 원소들의 형태와 양을 분석하여 체내 중금속 오염 정도와 영양 상태를 검사하여 건강을 체크하고 질병을 예방하는 과학적 검사입니다.

2. 모발 미네랄 검사의 장점

① 머리카락으로 표본채취가 쉽다.
② 모발의 경우 혈액이나 뇨분석에 비해 신체의 영양물질 및 독성물질의 축적에 의한 Historical Record를 정확히
측정할 수 있다.
③ 장기간의 무기물과다, 결핍을 정확히 알 수 있다.
④ 독성중금속의 양을 알아내는데 표본이 된다.
⑤ 모발을 통한 무기물분석은 다른 방법보다 저렴하다.

3. 모발 미네랄 검사가 필요한 경우

1) 유아, 어린이의 경우

① 아토피나 비염 등 알레르기가 있는 경우
② 잘 먹지 않거나 편식이 심한 경우
③ 체증 증가가 더디거나 저체중증, 왜소증을 보이는 경우
④ 행동과다, 집중력 저하, 우울증이나 급작스럽게 화를 내는 등 감정 조절에 문제를 보이는 경우
⑤ 성조숙증으로 의심되는 경우
⑥ 이유 없이 감기를 달고 살거나 중이염이나 부비동염과 같은 질환이 만성인 경우

2) 성인의 경우

① 만성피로를 느낄 때
② 자고 일어났을 때 개운하지 않거나, 근무력감을 보일 때
③ 급격한 체중의 변화가 보일 때
④ 입맛의 변화나 식욕을 잃었을 때
⑤ 암이나 고혈압, 당뇨, 고지혈증이나 기타 만성질환으로 건강 이상이 의심될 때

● 다음 항목 중 6개 이하인 경우 양호, 7개이상 10개 이하인 경우 주의, 11개 이상인 경우 검사가 꼭 필요한 경우에 해당합니다.

01. 매운 것을 먹지도 않았음에도 불구하고 혓바닥이 종종 화끈 거립니까 ?
02. 큰 걱정거리도 없는데 자주 잠을 잘 못 드십니까 ?
03. 춥지도 않은 날씨이지만 항상 손과 발이 차갑게 느낍니까 ?
04. 오징어나 감을 많이 먹지도 않았는데 변비가 자주 있으신가요?
05. 상한 음식이나 물을 갈아 먹지 않았는데 자주 설사가 있으신가요?
06. 사소할 수 있는 일도 결정을 내리지 못하고 주저한다고 느끼십니까 ?
07. 얼굴 및 팔다리의 근육이 자주 떨리거나 쥐가 잘나는 경향이 있으신가요?
08. 틀림이 없다고 생각했던 기억이 착각인 것으로 밝혀지는 일이 종종 있으신가요?
09. 몸이 풍선에 매달린 것처럼 붕 뜨는 것 같은 느낌을 종종 받으시나요 ?
10. 몸이 모기 등 벌레에 물린 것도 아닌데 종종 가려운가요?
11. 종종 숨쉬기가 힘들다고 느껴지십니까?
12. 늦은 밤에 과식을 한 것도 아닌데 몸이 자주 부으시나요?
13. 밤늦게 술이나 음료수를 많이 마신 것도 아닌데 밤에 소변이 자주 마려운가요?
14. 큰 질병을 앓는 것도 없는데 머리카락이 자주 많이 빠지는 탈모가 있으신가요?
15. 식사량이 많은 것도 아닌데 식사 후에 종종 두통이 있으신가요?
16. 매운 음식을 먹은 것도 아닌데 속이 화끈거릴 때가 종종 있으세요?
17. 아무런 이유가 없이 괜히 신경질이나 짜증이 자주 납니까?
18. 등산이나 계단을 다니지도 않는데 관절이 아프고 쑤시나요 ?
19. 본인이 생각해도 너무 신경이 예민해져 거슬리는 일이 많으신가요?
20. 팔과 다리에 통증을 나타내는 경련이 종종 있으세요?
21. 약수나 미네랄제품을 마시지도 않았는데 입에서 금속성 맛과 냄새가 납니까?
22. 무거운 물건을 들지도 않았는데 팔다리가 자주 저리신가요?
23. 크게 나쁜 일도 없는데 종종 우울하다고 느끼시나요 ?
24. 주위에 큰 소음을 내는 것도 없는데 귀에서 '윙'하는 소리가 종종 들리십니까?
25. 아무런 이유도 없이 울컥하고 갑작스럽게 화가 나십니까 ?
26. 크게 놀란 것도 없는데 가슴이 두근거리며 빨라지는 심장박동을 종종 느끼시나요 ?
27. 손이나 팔다리가 갑자기 떨리고 흔들리는 것을 종종 느끼십니까 ?
28. 어디에 크게 부디치거나 다친 적도 없는데 가슴에 통증을 종종 느끼시나요 ?
29. 무슨 큰 일 이나 힘든 일을 하지도 않았음에도 만성적으로 피로를 느끼나요 ?
30. 뭐에 물리거나 긁힌 적도 없는데 피부반점이나 피부가 가렵습니까 ?

4. 모발 채취 방법 (검체 채취 Kit 이용)

roundTable("ta");

개인 맞춤형 유전자 진단 (추후 제공 예정)

미래의 건강 사업은 단순한 발병한 질병의 진단과 치료보다는 발생 가능한 질병과 개인이 필요로 하는 영양성분의 분석을 통해 치료보다는 예방과 건강에 중점을 둔 방법이 주류를 이룰 것입니다. 이는 현재 판매되고 있는 수많은 건강 보조식품이 일률적으로 양산되어 각 개인이 자신에게 맞는 것을 선택하여야 하는 번거러움이 있습니다.

하지만 미래형 건강 유전자 검사는 유전자 검사를 통해 자신에게 필요한 영양 성분을 찾아 냄으로서 불필요한 건강 보조식품의 섭취를 줄이고 최적의 영양 상태를 만들어 다양한 질병의 발생을 사전에 예방할 수 있습니다.
저희 크라운진에서는 이를 본격적인 연구개발을 시작하였으며 이른 시일 안에 고객님들의 건강을 책임지는 종합 헬스케어 기업으로 거듭나도록 최선을 다하도록 하겠습니다.

건강·의학, 디엔에이, 디엔에이검사, 암검사, 암유전자검사, 유전자, 유전자검사, 친자확인, 친자확인검사

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특허출원 아벨리노검사

2009-11-13T08:20:11Z

1. 아벨리노 각막이상증이란 ?

아벨리노각막이상증(Avellino corneal dystrophy)은 정식명칭으로는 제2형 과립형각막이상증(Granular Corneal dystrophy type II)으로 불리며, 1988년 처음으로 이탈리아 아벨리노 지방에서 이민 온 가족에서 발견되어 세상에 알려지게 되었습니다. 1988년 전에도 국내뿐만아니라 전세계적으로 존재하여왔으며 유럽에 많은 제1형 과립형각막이상증과 구분없이 과립형 각막이상증으로 총칭되어 왔습니다. 아벨리노 각막 이상증은 양안 각막 중심부에 혼탁이 발생하는 질환으로 상염색체 우성유전을 하는 유전 질환입니다. βigh3 gene의 특정 부위의 돌연변이가 주 원인으로 알려져 있으며, 이 유전자의 돌연변이가 있는 사람은 각막 등의 상처부위에 단백질 침착이 일어나는 것으로 알려져 있습니다.

2. 원인

현재까지 알려진 각막 이상증의 원인은 βigh3 유전자의 특정부위 돌연변이가 큰 원인으로 알려져 있습니다. βigh3 유전자의 생성물인 βigh3 단백질이 상처 받은 각막에 많이 침착되어 있는 것을 볼 수 있습니다. 정확한 발생 기전이나 원인이 밝혀진 것은 아니며, 생활 자외선인 UVB에 의해서도 침착이 많이 발생하는 것으로 알려져 있습니다.

3. 발생빈도

한국의 아벨리노 각막 이상증은 연세대학교 세브란스병원 김응권 교수 연구팀에 의해서 알려져 있습니다. 국내의 한 연구에서 밝혀진 바로는 아벨리노 이형 접합자의 발생 빈도가 1/1320명 정도로 추정될 만큼 흔한 것으로 알려져 있습니다. 대한민국의 인구가 4800 만명으로 가정할 때 아벨리노 각막이상증의 원인이 되는 돌연변이 유전자를 보유하고 있는 인구가 4만명에 이를것으로 예상되고 있습니다.
● 참고 논문 : Moon JW, Kim SW, Kim TI, Cristol SL, Chung ES, Kim EK : Homozygous granular corneal dystrophy type II (Avellino coreal dystrophy):natural history and progression after treatment. Cornea 26(9) : 1095-100. 2007)

4. 검사의 필요성

βigh3 유전자 변이로 인한 아벨리노 각막이상증이 국내에 40000명 이상 있을 것으로 알려져 있습니다. βigh3 유전자 변이 각막이상증중 가장 흔한 아벨리노 각막이상증은 약 12세부터 흰색 반점이 각막에 나타나게 되고 환자의 나이가 증가함에 따라 점차 흰색 반점의 수가 많아지고 넓어져서 시력감소와 눈부심, 명도대비 감소로 인한 어둡게 보임등의 증상이 심해진다고 알려져 있습니다. 현재 국내에 약 40000명의 이형접합자가 존재하고 있는 것으로 알려져 있으며, 이러한 이형접합자중 증상이 심한 경우가 최근 많이 발생하고 있습니다.

또한 이형 접합자의 경우에는 20대와 30대에 들어서도 개인차 및 콘택트 렌즈의 사용과 같은 생활 환경 차이에 의해서 각막에 생기는 흰 점이 보이지 않을 수도 있으며, 이러한 경우 라식이나 라섹과 같은 시력교정술로 인해 급격한 시력 저하를 초래 할 수도 있기에 꼭 사전 검사를 통해 아벨리노 각막 이상증 유전자의 돌연변이 유·무를 확인해 보시는 것이 필요합니다.

1) 이형접합자의 경우 라식과 라섹등의 안과적 시력교정술을 받은 이후 시력의 급격한 저하를 초래할 수 있다.

- 아벨리노 각막 이상증과 관련된 유전자의 돌연변이가 있는 이형 접합자의 경우에 콘택트 렌즈의 착용 여부와 개인 생활 환경 차이로 인해 안과적 검사로 증상을 발견하지 못하는 경우가 발생할 수 있으며, 이러한 경우 라식과 라섹등의 시력교정술을 받게 된다면 급격한 시력 저하를 초래할 수 있습니다.

2) 아벨리노 각막이상증은 극동지역에서 많이 발생하는 것으로 알려져 있으며, 국내에서도 많은 환자가 있는
것으로 보고되고 있습니다.

- 아벨리노 각막이상증은 한국, 일본에 흔하며 일본의 경우는 사촌끼리의 결혼이 흔한 관계로 이형접합자 빈도를 계산하기가 쉽지 않습니다. 국내는 김응권 교수 연구팀에 의해서 1/1320명의 빈도로 나타난다고 발표하였습니다.

roundTable("ta");

크라운진의 특허출원한 아벨리노 검사

<아벨리노 각막이상증 검사>

각막이상증은 각막위에 불투명한 층이 형성되어 각막을 손상시킴으로서 시력을 저하시키거나 또는 실명하게 만드는 유전 질환이다(1). 1997년 Munier 등에 의해 사람의 5번 염색체의 q arm (장완) 31번 위치에 존재하는 것으로 확인된 transforming growth factor beta-induced (TGFBI) 유전자에서 발생하는 돌연변이들은 크게 코돈 124와 코돈 555의 돌연변이로 나뉘어 진다. 코돈 124의 돌연변이로 인해 발생하는 각막이상증은 아벨리노 각막이상증 (CGC→CAC : Arginine→Histidine : R124H), 격자각막이상증 (CGC→TGC : Arginine→Cycteine : R124C)이며, 코돈 555의 돌연변이로 인해 발생하는 각막이상증은 라이스-뷔클러 각막이상증 (CGG→CAG : Arginine→Glutamine : R555Q), 과립각막이상증 (CGG→TGG : Arginine→Tryptophan : R555W) 등이 있다(2).

Figure 1. 아벨리노 각막이상증 원인 유전자 (Transforming growth factor b-induced gene : TGFBI ) 의 exon 4 내 코돈 124의 돌연변이 분석 결과 :
A : 정상 코돈(CGC Arg124), B : 돌연변이 코돈 (CAC His124), C : 이형접합 코돈 (CGC Arg124, CAC His124).

TGFBI 유전자 돌연변이에 의한 각막이상증 중 특히 아벨리노 각막이상증은 각막에 각막기질 혼탁을 유발하는 상염색체 우성의 양안성 병변을 보이는 유전질환으로서. 최근 임상적으로 과립각막이상증으로 진단 받은 환자의 91%에서 TGFBi 유전자의 코돈 555의 돌연변이에 의한 과립각막이상증이 아닌 코돈 124의 돌연변이에 의한 아벨리노 각막이상증 임이 보고된 바 있다(3). 또한 라식(LASIK) 시술이후 각막이상증이 악화되다는 보고(4)(Fig. 2)가 있어 각막이상증의 정확한 진단 및 라식(LASIK) 시술이후 각막이상증의 악화를 방지하기 위하여 TGFBi 유전자의 돌연변이 검사가 필수적이다.

Figure 2. Avellino corneal dystrophy worsening after laser in situ keratomileusis (LASIK). (Left) Slitlamp photography of the cornea of the left eye showing extensive granular deposits. (Right) The deposits are scattered in the anterior stroma, but are mainly concentrated in the LASIK flap interface.

특정 유전자 내에 존재하는 돌연변이를 분석하는 방법은 전통적으로 특정 유전자의 중합효소 연쇄반응 Polymerase chain reaction: PCR) 산물에 제한효소를 처리하여 돌연변이 여부를 분석하는 PCR-RFLP 방법, 특정 유전자의 PCR 산물의 염기서열을 분석하는 염기서열을 분석하는 방법 등이 있으나, 이들 방법들은 시간이 많이 소요되는 단점이 있어 일상적인 TGFBI 유전자 돌연변이 분석 방법으로 활용하기에는 어려움이 있다.

최근 TGFBI 유전자의 돌연변이를 검사한는 방법으로 TGFBi 유전자의 PCR 산물에 프라이머를 부착시킨 다음 각각의 돌연변이에 대응하는 ddNTP 들을 신장시켜 분석하는 스냅샷 (SNaPShot) 방법, TGFBi 유전자의 PCR 산물에 프라이머를 부착시킨 다음 여러 가지 효소 (DNA polymerase, Sulfurylase, Luciferase, Apyrase) 들을 사용하여 방출되는 옥시루시페린(oxyluciferin)을 CCD 카메라로 검출함으로서 돌연변이를 분석하는 파이로시퀀싱 (pyrosequencing) 방법 등이 개발되어 사용되고 있으나, 이들 방법 또한 시간이 많이 소요되거나 고가의 장비를 사용하여야 할 뿐만 아니라, PCR 산물을 정제한 후 다시 다른 과정을 수행해야 하는 등 절차가 복잡하여 일상적으로 사용하기에는 많은 제약이 따른다.

본 연구진들이 개발한 High resolution melting (HRM) 방법을 이용한 TGFBi 유전자 돌연변이 검사 방법은 상기한 기존의 방법들의 문제점을 개선한 새로운 검사 방법으로서 그 방법과 절차가 단순하여, 누구나 손쉽게 사용할 수 있으며, 또한 검사에 걸리는 소요시간도 짧아 일상적인 TGFBi 유전자 돌연변이 검사 방법으로서 널리 활용될 수 있다.

실시간 유전자 증폭 장치 (Real-time PCR)를 이용한 HRM 방법은 이중가닥의 DNA를 단일가닥의 DNA로 변환시키고, 이때 DNA 가닥의 형태가 변환되는 온도 (Tm)를 분석하여 돌연변이 여부를 검사하는 방법으로서, DNA 시료 채취 후 HRM 분석에 소요되는 시간은 약 2 시간 30 분 정도이다.

TGFBi 유전자 돌연변이 검사 방법에 HRM 방법을 도입할 경우 환자 시료 내 DNA 추출 및 돌연변이 여부 분석에 총 3시간 30 분 정도가 소요됨으로 오전에 시료 채취 후 오후에 검사결과에 따라 라식 시술을 시행할 수 있는 장점이 있다.

Figure 3. High-resolution melting analysis of a PCR product derived from the human TGFBI gene. Wild type sample is shown in blue, heterozygote mutant in red.

< References >

1. Cogan DG, Donaldson DD, Kuwabara T, Marshall D. Microcystic dystrophy of the corneal epithelium. Trans Am Ophthalmol Soc 1964;63:213-25.

2. Munier FL, Korvatska E, Djemai A, Le Paslier D, Zografos L, Pescia G, Schorderet DF. Kerato-epithelin mutations in four 5q31-linked corneal dystrophies. Nat Genet 1997; 15:247-51.

3. Jee DH, Lee YD, Kim MS. Epidemiology of corneal dystrophy in Korea. J Korean Ophthalmol Soc 2003;44:581-7.

4. Awwad ST, Di Pascuale MA, Hogan RN, Forstot SL, McCulley JP, Cavanagh HD. Avellino corneal dystrophy worsening after laser in situ keratomileusis: further clinicopathologic observations and proposed pathogenesis. Am J Ophthalmol. 2008 Apr;145(4):656-61. Epub 2008 Feb 19.

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검사신청절차

1. 유전자 검사가 가능한 병원 및 저희 회사를 통행서 유전자 검사에 대한 자세한 설명을 들으신 후 상담자의 안내에 따라 유전자 검사 신청서를 작성하시면 됩니다.

2. 유전자 검사 신청서를 작성하신 후에는 병원에 따라 전혈 채취나 모근이 있는 머리카락 또는 입안의 상피 세포를 채취하여 저희 회사로 보내거나 홈페이지상에서 직접 검체 체취키트를
신청하여 받으신 후 검체를 체취해서 보내주시면 됩니다.

3. 각각의 방법으로 채취된 세포들은 적절한 표기와 보관을 거쳐 당사로 이송되게 됩니다.

4. 이송된 세포들은 실제로 검사에 필요한 유전자를 추출 하는 과정에 들어가며, 몇가지의 과정을 거쳐 보내주신 세포에서 분석을 위한 유전자가 추출 되어 집니다.

5. 이렇게 추출 되어진 유전자를 실제 아벨리노와 관련하여 개발된 특허받은 리얼타임PCR을
이용하여 유전자의 돌연변이 분석을 시행하게 됩니다.

6. 분석되어진 결과는 최초 검사를 시행한 병원 및 개인에게 발송되게 됩니다.

7. 본인 유전자의 돌연변이 유무는 홈페이지 및 접수 병원에서 확인 가능합니다.

아벨리노 검사 협력 안과 병·의원 모집

(주)크라운진에서는 아벨리노검사와 관련된 업무협력을 이룰 협력 안과 병·의원을 모집합니다.

자세한 문의사항은 전화 1644-7207 로 문의하여 주시기 바랍니다.

건강·의학, 국적취득, 디엔에이검사, 암검사, 암유전자검사, 유전자검사, 친자검사, 친자확인, 친자확인검사, 친자확인유전자검사

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암진단 유전자검사

2009-11-13T08:18:30Z

암 검사는 다음과 같은 장점을 가지고 있습니다.

암세포의 발생 초기에 확인 가능 (1 cm 미만의 상태에서도 확인)
검사의 편리성 - 혈액만으로 검사 (예약하고 기다리거나, 내시경, MRI, CT, 초음파 검사등의 고통과 불편함이 없습니다.)
검사의 효율성 - 한꺼번에 모든 암의 유무와 그 종류를 확인
검사의 정확성 - MRI, CT, 초음파, 내시경으로 보이지 않는 암 발견
검사의 경제성 - 여러가지 암을 개별적으로 검사하는 경우 많은 비용이 들어 갑니다.

의학이 발달한 오늘날에도 암은 인류에 있어 사망과 삶의 질 악화의 주 원인이며, 암 환자 중 절반 이상은 진행된 상태에서 늦게 발견되며, 그 대부분은 진단 후 2년 이내에 사망합니다. 이와 같은 불량한 성적은 전이 암에 대해 효과적인 치료법이 없다는 것 외에도 조기진단이 여의치 않다는 데에도 중요한 원인이 있습니다. 심지어 이미 진단된 암도 병기와 예후를 정확히 평가하며 치료방침을 결정하고 치료 후 재발암과 잔존 암을 정확하게 파악하는 데 어려움이 적지 않은 것이 현실입니다. 이와 같은 현존 진단법을 보완해 줄 수 있는 가장 유력한 방법이 곧 유전자 암 진단법 입니다.

암은 대표적인 유전자질환으로, 여러 가지 유전자의 이상이 축적되면서 발생하며 더 악성으로 진행합니다. 최근 암의 발생과 진행에 중요한 역할을 하는 유전자들이 다수 밝혀지고 있으며, 획기적인 유전자검사 방법이 속속 개발되고 있습니다. 이에 따라 임상진료에서도 암의 유전자진단이 활발하게 시도되는 추세입니다.

암이 있으나 암의 크기가 작아서 육안적으로 식별이 되지 않을 때에도 혈액이나 대소변, 객담 등에는 미세암세포와 암세포에서 나온 돌연변이유전자의 DNA가 존재합니다. 분자유전학적 검사를 이용하면 이러한 미량의 암 DNA를 파악하여 암을 진단할 수 있습니다. 다만 암은 특징적으로 다수의 유전자이상에 의해, 다단계를 거쳐 발생하는 질환이며, 같은 종류의 암도 개개 환자별로 이상 유전자가 다릅니다. 따라서 암을 정확히 진단하기 위해서는 그 암에서 나타나는 변이 유전자를 모두 동시에 검사하는 것이 중요합니다.

저희 연구진들은 인체 암의 증식과 대사에 중요한 역할을 하는 유전자를 상당수 새로이 발견 하였으며, 여러 유전자의 돌연변이를 동시에 정확하고 신속하게 검사할 수 있는 올리고칩(oligonucleotide DNA chip)과 4색 형광스캐너를 개발하였습니다. 이에 따라 본사는 기존에 밝혀진 암의 중요 유전자에 신규 유전자들을 총망라하여 수십 개의 유전자를 함께 분석 함으로써 암을 진단하는 시스템을 완성하였습니다. 이것이 곧 멀티플렉스 유전자진단 시스템 (multiplex genetic testing system)입니다. 본 사의 멀티플렉스 유전자진단 시스템을 이용하면 환자의 각종 검체 내에 존재하는 암의 다양한 변이 유전자를 대부분 파악할 수 있으며, 이는 자동화된 시스템입니다. 이에 따라 한꺼번에 다수의 환자에서 정확하고 신속하게 암을 진단할 수 있습니다.

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이중기능성 화장품 ms-ll 출시

2009-11-13T08:16:49Z

이중 기능성화장품 MS-ll 출시 진헬스케어

2009/11/13 08:08

http://blog.naver.com/crowngene/50075811807

		SYSTEM은 BIO + Nature + Fermentation의 과학을 통하여 생명과 자연이 지닌 신비로움을 피부에서 느낄 수 있도록 해 드립니다. 피부에 영양을 공급하여 피부세포를 활성화시키고, 주름개선, 보습효과 피부재생 및 피부진정에 탁월한 효과를 줍니다. 멜라닌 색소 생성의 예방과 이미 생성된 기미, 잡티까지 관리해 칙칙하고 얼룩진 피부톤을 맑고 투명하게 가꿔주는 역할을 합니다.

	※ 피부의 TYPE에 따라 만들어진 무독성 천연기능성 화장품을 함께 사용하시면 더욱 효과를 빨리 보실 수 있습니다. ※ SYSTEM관리 후 화학성 방부제 등이 함유된 화장품을 사용하실 경우 피부 트러블이 있을 수 있습니다.



	미세한 침으로 표피층과 진피층을 자극하여 콜라겐과 엘라스틴을 자체 생성시켜주는 방법으로 레이저 박피, 필링과는 달리 피부층이 얇아지지않고 오히려 더 두터워지며 색소침착, 넓은 모공, 여드름 흉터, 주름, 탈모, 화상 흉터, 잔주름, 튼 살, 목주름 등과 같은 문제성 피부에 사용합니다.

		니들링이 된 부위에 가 지닌 고기능 성분을 직접 침투시켜 피부톤의 정리와 탄력증진에 매우 효과적입니다. 또한 192개의 microneedle이 약 5분 적용시에 15~20 만개의 엄청난 통과통로를 제공하여 유효성분을 전달함으로써 효과를 극대화 시킬 수 있습니다. 부작용이 없고 안전한 MRS System은 피부관리 후 하루 정도 관리부위가 약간 붉은 것을 제외하고는 화장 등 일상생활에 전혀 지장이 없습니다. 피부세포 본연의 자생력과 면역력을 회복시켜 크라운진 (CrownGene) 만의 자연치유 노하우를 바탕으로 피부의 노화를 막고 건강한 젊음을 유지시켜 주는 자연치유 테라피를 지향합니다.



	피부에 약품이나 화장품의 유효성분이 대량으로 통과하는 통로를 만들어 이용 성분의 흡수효과를 배가시켜 준다. 먹을 때 보다 약물 혹은 영양물의 조직 내 농도가 훨씬 높다.
	주로 1~2주에 한 번 시술 받게 되며 약품이나 화장품의 유효성분이 치료하고자 하는 부위에 서서히 작용하므 로 한 번 시술로 1~2주간 효과가 지속된다.
	오렌지 껍질같은 거친 피부나 튼살, 피부 흉터, 주름, 탈모, anti-aging 등 미용치료에 효과를 보이는 혁신적인 방법입니다.



	Orchid Callus System Extract(난 조직 배양물질)
	피부세포 성장 및 증식에 관여하며 피부세포를 활성화하여 보습효과 및 피부진정에 탁월한 효과가 있습니다.

	EGF(Human Oligo Peptide-1: 상피세포 성장인자)
	상처를 흉터없이 자연적으로 아물게 하는 작용이 탁월한 것으로 알려져 있습니다.

	Witense(화이텐스)
	화이트닝 효과를 위한 유로코스텍의 특수추출방법으로 효능, 효과를 극대화시킨 생약복합물로 기존 알부틴의 미백효과보다 안전하면서도 100배 정도 효과가 월등하다고 알려져 있습니다.

	발효물질 함유
	Lactobacillus/Soybean Extract Ferment Filtrate(락토바실러스/콩추출물 발효 여과물) : 미생물 발효에 의한 나노 입자화, 제니스텐의 강력한 활성 증가

	PGA : 100% Powder(Polyglutamic Acid / 폴리글루타믹애씨드)
	: 청국장의 끈적이는 물질로써 황산화와 항암 효과가 매우 우수함 : 염증 완화기능(특허 제0582120호)

	Adenosin(아데노신)
	피부에서 안정성과 지속력이 뛰어나며, 피부의 탄력과 주름개선을 도와줍니다. 피부개선제인 레티놀에 비해 안정성이 좋고 부작용이 적은 장점이 있으며, 식약청 지정 주름개선 기능성 성분입니다.

	AA2G(Ascorbic Acid 2 - Glucoside)
	안정화된 Vitamin-C 유도체로서 신개념 미백성분으로 피부의 기미, 잡티의 원인이 되는 멜라닌색소 생성의 예방과 이미 생성된 기미, 잡티까지 관리해 칙칙하고 얼룩진 피부톤을 맑고 투명하게 가꿔주는 역할을 합니다.

	Arbutin(알부틴)
	월귤나무에서 추출한 성분으로 피부를 희게 개선시켜주는 작용이 우수하며 식약청 지정 미백개선 기능성 성분입니다.

사용 전

사용 후

사용 전

사용 후

사용 전

사용 후

ACNE(여드름) 사용 전

ACNE(여드름) 사용 후

SCAR(흉터) 사용 전

SCAR(흉터) 사용 후

사용 전

사용 후

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친자학인 귀후빈 면봉으로 가능한지?

2009-10-12T07:33:52Z

귀후빈 면봉도 검사되나요?

저희 아버지께서 샤워를 하시면 항상 귀를 청소하십니다.
그래서 제가 몇개 모아논게 있는데 이것도 상피세포라 검사가 될것 같은데 제 생각이 맞는가요?
검사가 된다면 검사시간을 얼마나 걸리는지 알려주세요.

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

귀후빈 면봉으로도 검사 가능합니다.
DNA검출하기에 적합한 양만큼 준비되어 있다면 DNA분석 또한 어렵지 않습니다.

검사수행 12시간 소요됩니다.

문의사항이 있으시면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 상담해드리겠습니다.

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정액검사 가능할지

2009-10-12T07:32:47Z

외도로 이혼을 하려고 하는데 그전에 외도 흔적을 찾아야 한다길래 팬티에 정액이 있는지 없는지를 확인받으려고 검사 신청을 합니다.
검사를 하면 몇일정도면 확인 받을 수 있나요?
그리고 dna라는걸 검사를 해야만 확실하다고 하는데 dan검사는 어떻게 하는건지 설명부탁드립니다.

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

팬티의 정액반응검사는 1시간 이내로 감정이 가능하며,

속옷에서 정액이 검출되면 검출된 정액의 DNA와 고객님의 DNA와 비교하여 동일인확인 여부를 감정받으실 수 있습니다.

동일인확인 검사를 하기 위해서는 고객님의 머리카락(모근이 붙은)이 5가닥정도 필요합니다. 검사수행 시간은 12시간 입니다.

만약 속옷의 정액이 무정자증, 정관수술을 한 정액이라면 DNA검출이 어렵습니다.

질의주신 답변에 대한 문의사항이 있으시면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 상담해드리겠습니다.

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유전자검사 가능할까요?

2009-10-12T07:31:27Z

유전자검사 가능할까요? 질문과답변

2009/10/12 07:29

http://blog.naver.com/crowngene/50073590739

이 포스트를 보낸곳 ()

조카가 입에 물고 있던 쪽쪽이를 제가 가지고 있는데 이것도 검사를 할수있나요??
올케가 애기 옆에 딱달라붙어 있어서 이것저것 준비할수 없는데 올케몰래 숨겨놨거든요
이게된다면 좋겠는데 검사가 안된다고하면 몰래 가져다놔야 할것같습니다.
빨리 알려주세요.

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

가지고계신 노리개젖꼭지로도 검사 가능합니다.
노리개젖꼭지에는 아기 구강상피세포가 묻어 있기때문에 친자확인검사를 수행할 수 있습니다.

친자확인 검사소요시간은 12시간입니다.

추가 문의사항이 있으시면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 상담해드리겠습니다.

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혈육관계확인 친자확인검사

2009-09-21T09:05:21Z

혈육관계 확인 검사

부모님 돌아가시기전 잃어버린 동생을 찾기 위해 무단히 노력했습니다.
어릴적 정황이 맞는 사람들을 몇몇 추려서 정말 제 혈육이 맞는지를 확인 받으려고 하는데 검사신청을 어떻게 해야 합니까?
만약 맞으면 호적에 올려야 하기때문에 검사가 정확해야 합니다.
돌아가시기전 효도다운 효도를 해드리고싶어서 검사를 하는것이기때문에 신경좀 써주십시오.
검사신청에 대해서 구체적으로 말씀해주시고 내용을 읽어보고 모르겠거나 이해 안되는 부분이 있으면 전화드려서 다시 여쭤봐도 괜찮을까요?

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

부모님과 잃어버리신 동생과 친자확인검사를 하시면 됩니다.

친자확인검사를 통해 친자녀로 확인시 호적등재 신청시 검사방법은 다음과 같습니다.
1. 피검사자의 신원확인 (주민등록증 또는 운전면허증의 사진과 얼굴대조, 주민번호확인)
2. 유전자검사 신청서와 유전자검사 동의서를 작성
3. 당기관에 재직중인 직원이 피검사자의 검체(시료)를 직접채취

검사진행 절차를 안내해드렸습니다

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친자검사문의

2009-09-21T09:03:50Z

친자검사 문의

첫째아이는 5살,
둘째아이는 3살 입니다.
두 아이는 뭘로 검사를 해야 하나요?

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

핀셋으로 머리카락을 뽑아보시고 머리카락에 모근이 붙어서 뽑힐경우엔 모근이 붙은 머리카락 5가닥정도 채취하시면 됩니다.

만약 모근이 확인 불가능할 시 면봉으로 입안쪽 볼살을 10회~20회정도 문질러 주십시오. 1인에 면봉 2개씩 채취하셔야 합니다.

위 두가지의 검체채취가 어려우실 경우 손.발톱이나, 씹던껌, 혈흔, 칫솔등 을 보내주시면 됩니다.

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정액확인 문의

2009-09-21T08:58:31Z

정액확인 문의

속옷에서 정액이 얼마나 버틸수 있나요?팬티를 보관한지 약2주정도 됐습니다.
검사할 수 있나요?

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

검사수행 가능한 기간은 정해져 있지 않기때문에 속옷에 묻은 정액이 부패나 변성되지 않았다면 DNA검출이 가능합니다.

검사판정에 있어 발견즉시 검사를 하시는게 가장 좋으며, 현재로써는 검사수행을 하지 않고서는 정확하게 결과를 말씀드릴 수 없습니다.

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친자확인 껌으로가능?

2009-09-02T08:06:05Z

친자검사를 하려고 하는데 껌으로도 된다고 들었습니다.
껌으로 한다고 하면 얼마나 필요양이 있는지 알려주세요.
풍성껌 2개가 있는데
1개는 1주일전에 씹었던거고 1개는 어제 씹었던겁니다.
두개다 필요한지 아니면 더 필요한지 알려주세요.

답변입니다.

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

껌으로도 친자확인검사 가능합니다.

껌속에 구강상피세포(DNA)가 얼마나 확인되는지는 육안으로 판단하기 어렵습니다.
그렇기때문에 보관하고 계신 껌 2개다 보내주십시오.

검사수행 소요시간은 12시간입니다.

검사검체에 대한 추가 문의사항이 있으시면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 답변드리겠습니다.

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유전자검사 문의

2009-09-02T08:04:10Z

요새 친자검사라는걸 쉽게해서 저도 해보려고 합니다.
어떻게 검사를 해야하는지 절차 설명좀 부탁드립니다.
그리고 결제방법도 설명해주세요.

답변입니다.

고객님 안녕하세요.
(주)크라운진 입니다.

검사신청 방법을 설명해드리겠습니다.

1. 친자확인검사 개인확인용 검사시 :
ㄱ) 내방검사
ㄴ) 피검사자의 검체물을 등기(또는 택배) 발송
ㄷ) 검사비입금 (카드, 계좌입금, 현금)

2. 친자확인검사 제출용 검사시 :
ㄱ) 내방검사
ㄴ) 출장방문의뢰
ㄷ) 검사비입금 (카드, 계좌입금, 현금)

보다 자세한 상담을 원하신다면 1644-7207번으로 연락주십시오.
친절하게 상담해드리겠습니다.

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